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技术资料/正文

病毒DNA-RNA提取试剂盒(吸附柱法)XK

98 人阅读发布时间:2022-08-12 11:29

【产品名称】
通用名    :病毒DNA/RNA提取试剂盒(吸附柱法)
Name      Virus DNA/RNA Extraction KitAdsorption column method
 
【产品介绍】
本试剂盒可以从多种样本中提取DNA/RNA,包括全血、血清血浆、固体组织和体液等。处理的样本加入裂解液后,把混合物移至吸附柱中,之后可以通过洗涤、洗脱,即可分离出病毒DNA/RNA
本试剂盒提取的核酸可以用于Real-time PCRNorthern BlotBlotting Hybridization cDNA library Construction等实验。

【试剂组成】
  规格
裂解液 25mL
去蛋白漂洗液 15mL(使用前加入10mL无水乙醇)
洗涤液 12mL(使用前加入48mL无水乙醇)
洗脱液 5mL
吸附柱 50
使用说明书 1

【试剂规格】50T/盒。
【储存运输】
    室温保存,有效期12个月。可室温下运输。
自备材料
    灭菌的1.5mL离心管、各种规格灭菌的枪头、离心机(最大转速≥12000rpm)、无水乙醇、漩涡混合器等。

【检测方法】
  • 样本前处理
1.对全血、血浆、腹水、唾液、生理盐水或PBS处理的拭子上清液等非粘稠液体样本的病毒,可以直接取200μL样品进行核酸提取;
2.对于动、植物组织以及粪便等样品加入适量的生理盐水或PBS,研磨后充分震荡混匀或直接震荡混匀(粪便样品),12000rpm离心5分钟,取200μL上清进行核酸提取。对于痰液、肺泡灌洗液等粘稠样品,取100μL样品到1.5mL离心管中,加入100μL痰液液化剂,震荡混匀,37℃温浴10min,瞬时离心后取200μL上清进行核酸提取。
  • 试剂准备
    试剂盒室温保存,如保存温度过低,应平衡至室温或者温浴,确保各溶液无盐份析出。按照说明书要求在去蛋白漂洗液和洗涤液中加入乙醇。
  • 样本提取操作
1.取干净的1.5mL离心管,向离心管中加入200μL上述处理好的样品(不足200μL,可以加入PBS缓冲液或者生理盐水补足200μL),加入500μL裂解液,盖上管盖,振荡30秒;
2.把上述混合物转移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免阻塞吸附膜),12000rpm离心1分钟,弃去套管中液体;
3.向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液(以按说明书加乙醇),12000rpm离心1min,弃去套管中液体;
4.向吸附柱中加入500μL 洗涤液(以按说明书加乙醇),12000rpm离心1min,弃去套管中液体;
5.向吸附柱中加入500μL 洗涤液(以按说明书加乙醇),12000rpm离心1min,弃去套管中液体;
6.把吸附柱放回套管中,12000rpm离心2min
7.把吸附柱转移至新的1.5mL离心管中,加入 50μL洗脱液,室温放置2分钟;
8.12000rpm离心1min,弃去吸附柱,1.5mL灭菌离心管中液体即为提取的核酸溶液。可以直接用于
下游实验,如不立即使用,请于-80℃保存。

检测结果的解释
本试剂盒适用于全血、血浆、血清、腹水、唾液、组织以及粪便等样品。

注检测方法的局限性
样品量,液体样品不超过200μL,固体组织样品需要研磨上清;灵敏度,使用时需配以高灵敏度的PCR检测试剂和仪器。

性能指标
假病毒提取产物(DNARNA)经高灵敏度的核酸检测试剂确定灵敏度为102 copies/mL,线性范围为103-107 copies/mL

注意事项
1.试剂各组分室温保存,避免形成结晶,如形成结晶,平衡至室温或温浴使结晶溶解;
2.去蛋白酶漂洗液、洗涤液使用前按照说明书要求加入乙醇;
3.提取的核酸立即用于下游实验,如不立即使用,请保存于-80℃冰箱。

【生产企业】
企业名称:上海晅科生物科技有限公司
 
资料格式:

病毒DNA-RNA提取试剂盒(吸附柱法)XK.doc

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